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            Taq-Klenow聚合酶

             更新時間:2018-07-19 點(diǎn)擊量:1678

             

            Molecular Cloning Laboratories(MCLAB)成立于1998年,是為生命科學(xué)界提供基因組研究耗材和服務(wù)的先進(jìn)者。

            MCLAB提供具有成本效益的消耗品和試劑,專注于代以及新一代測序和DNA段分析。我們提供大量分子生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品,包括抗體,生化試劑,克隆試劑盒,酶,PCR試劑盒,蛋白質(zhì)凝膠和溶液等。作為我們自己的制造商,我們可以控制生產(chǎn)流程,并大限度地減少定制和大規(guī)模訂單的延遲。它有助于確保我們的客戶獲得高質(zhì)量和價值。

            MCLAB擁有一支由20 多位經(jīng)驗(yàn)豐富的科學(xué)家組成的團(tuán)隊(duì),致力于為研究人員提供的服務(wù)。我們專注于基因組學(xué)領(lǐng)域,擁有DNA測序,發(fā)酵,片段分析,分子克隆,過表達(dá),蛋白質(zhì)純化和蛋白質(zhì)合成方面的專家。我們采用量身定制的客戶服務(wù)方式,讓您有機(jī)會定制您的項(xiàng)目,并直接與我們的科學(xué)家團(tuán)隊(duì)交流以獲得技術(shù)支持。憑借二十多年的經(jīng)驗(yàn),我們才華橫溢,技術(shù)的員工致力于為您提供所需的成果。

            Taq-Klenow聚合酶

            名稱

            貓#

            尺寸

            濃度

            Taq酶,克列諾

            TT-100

            1,250個單位

            5 U /μl

            Taq酶,克列諾

            TT-200

            5,000單位

            5 U /μl

            Taq酶,克列諾

            TT-OEM

            任何尺寸

             

            Taq- Klenow 通過截短其N-末端從全長Taq DNA聚合酶修飾,分子量為61kDa。

            描述:
            Taq -Klenow 通過截短其N-末端從全長Taq- Klenow 修飾,分子量為61kDa。與常規(guī)Taq- Klenow 相比,這種截短形式缺乏5' - > 3'外切核酸酶活性,但更具熱穩(wěn)定性,并且在PCR擴(kuò)增中具有更高的保真度。

            應(yīng)用:
            - PCR(普通和高通量)
            - 引物延伸
            - 微陣列分析
            - 變性液相色譜(DHPLC)

            來源:攜帶來自嗜熱生物Thermus Aquaticus YT-1 的Taq- Klenow基因的
            重組大腸桿菌菌株。

            供應(yīng):
            10x Taq PCR Buffer(無dNTP)

            提供:
            20 mM Tris-HCl 
            100 mM NaCl 
            1.0 mM DTT 
            0.1 mM EDTA 
            穩(wěn)定劑
            50%甘油
            pH 7.5 @ 25°C 

            單位定義:
            1單位定義為酶量將在75℃下在30分鐘內(nèi)將10nmol的dNTP摻入酸不溶性材料中。

            PCR指南:
            Taq -Klenow是初和常用的PCR酶。Taq酶擅長于從低復(fù)雜性模板來源擴(kuò)增較短(<5kb)的序列,并且在很少或沒有優(yōu)化反應(yīng)條件的情況下產(chǎn)生穩(wěn)健的產(chǎn)率。在使用Taq DSC 2.0 DNA聚合酶設(shè)計PCR策略時,請考慮以下指南。

            1. DNA模板:盡管通常不需要對PCR模板進(jìn)行大量純化,但應(yīng)注意粗制或部分純化的DNA來源,因?yàn)樘幚砗突瘜W(xué)試劑會對PCR過程產(chǎn)生不利影響。應(yīng)避免接觸短波紫外線或其他DNA損傷劑,高離子強(qiáng)度,SDS,加載染料和苯酚等清潔劑也應(yīng)避免接觸。為了防止以前的PCR反應(yīng)造成污染,請考慮在正壓罩和氣溶膠屏障吸管設(shè)置反應(yīng)。在典型的25個循環(huán)PCR中,104個拷貝的靶序列將產(chǎn)生可重復(fù)的擴(kuò)增產(chǎn)物。這相當(dāng)于大約0.1-1ng / ml(終濃度)的質(zhì)粒DNA和1-10μg/ ml的基因組DNA。使用較低的DNA濃度通常會產(chǎn)生較少的非特異性產(chǎn)物,

            2.引物設(shè)計:理想地,寡核苷酸引物長度為15-30個堿基,接近50%G + C,并具有相等的(+/- 3℃)退火溫度。建議使用軟件來檢測自身互補(bǔ)或發(fā)夾易發(fā)區(qū)域,并由一些綜合提供商提供服務(wù)。注意,雖然引物的5'末端可能包含未模板序列,但3'末端必須*匹配。反應(yīng)中典型的寡核苷酸濃度為0.1-0.5μM。

            3.鎂:鎂是PCR反應(yīng)的關(guān)鍵組成部分,盡管其濃度可以調(diào)節(jié)以促進(jìn)各種效應(yīng)。通常,1.5-2.0mM Mg 2+靶向,但更高的濃度(高達(dá)5mM)可用于以保真度為代價刺激反應(yīng)的產(chǎn)率。相反的情況也是如此 - 較低的鎂濃度將促進(jìn)更高保真度的產(chǎn)品,總體擴(kuò)增產(chǎn)率更低。注意,某些反應(yīng)組分,特別是模板DNA和寡核苷酸,可能為反應(yīng)提供螯合劑,這會降低有效的鎂濃度并使反應(yīng)餓死。

            4. dNTP:通常,使用100-200μMdNTP的終濃度,盡管更高的濃度可以刺激產(chǎn)量(特別是對于更長的靶標(biāo))并且更低的可以提供保真度的增加。Taq酶DSC 2.0 DNA聚合酶還可以摻入和讀取脫氧尿苷和肌苷,這兩種類似物在某些應(yīng)用中使用。

            5. Taq DSC 2.0聚合酶:典型的是1單位/50μL反應(yīng)(20U / mL),但可以添加額外的酶以刺激產(chǎn)率。Taq DSC 2.0 DNA聚合酶以大約1-2000個核苷酸/分鐘擴(kuò)展DNA模板,因此建議每個循環(huán)每個kb應(yīng)提供30-60秒的延伸時間。適當(dāng)?shù)难由鞙囟确秶鸀?8-72°C。因?yàn)?/span>Taq DSC 2.0 DNA聚合酶利用DNA聚合酶對雙鏈DNA段的天然親和力來促進(jìn)其熱啟動功能,所以它不需要廣泛的初始變性步驟來激活聚合酶。

            典型的50μl反應(yīng):
            在冰上,準(zhǔn)備以下每種主混合物,合并,并置于加熱(至94°C)熱循環(huán)儀中:

            2x DNA /寡核苷酸主混合物:
            1.0μl10mM 
            dNTPs1.0μl10μMFrontPrimer 
            1.0微升10μM反向引物
            1.0微升500納克/微升基因組DNA 
            21微升I型水

            2X酶/緩沖液預(yù)混:
            5.0微升10X 的Taq PCR緩沖液(無的dNTP)
            0.2微升5單位/微升的Taq DSC 2.0 DNA聚合酶
            19.8微升I型水

            推薦儲存條件: -20°C

            部分產(chǎn)品:

            名稱

            貨號

            尺寸

            濃度

            大腸桿菌DNA連接酶

            EDLA-100

            1,000個單位

            10,000 U / ml

            大腸桿菌DNA連接酶

            EDLA-200

            5,000個單位

            10,000 U / ml

            大腸桿菌DNA連接酶

            EDLA-OEM

            任何尺寸

             

             

            APE 1

            APE-100

            3,750 units

            15,000 U/ml

            APE 1

            APE-200

            15,000 units

            15,000 U/ml

            APE 1

            APE-OEM

            Any Size

             

             

            名稱

            貨號

            描述

            I-5™2X高保真混色

            I5HM-100

            100次反應(yīng)(50μl體積)

            I-5™2X高保真混色

            I5HM-200

            500次反應(yīng)(50μl體積)

            I-5™2X高保真混色

            I5HM-5000

            5,000次反應(yīng)(50μl體積)

            I-5™2X高保真混色

            I5HM-25K

            25,000次反應(yīng)(50μl體積)

            I-5™2X高保真混色

            I5HM-OEM

            OEM

            名稱

            貨號

            描述

            2x BlueStar™PCR Master Mix

            BSPM-100

            100次反應(yīng)(50μl體積)

            2x BlueStar™PCR Master Mix

            BSPM-200

            1,000次反應(yīng)(50μl體積)

             

            名稱

            貨號

            尺寸

            HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

            HT-200

            500個單位,5 U /μl

            HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

            HT-205

            2,500個單位,5 U /μl

            HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

            HT-210

            5,000單位,5 U /μl

            HoTaq DNA聚合酶(熱啟動)

            HT-OEM

            任何尺寸

            名稱

            貨號

            描述

            10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

            PBS10-100

            500毫升

            10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

            PBS10-200

            1升

            10 x PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)

            PBS10-OEM

            OEM

             

             

             

             

             

             

             

            名稱

            貨號

            描述

            I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

            PDP-100

            250單位,2.5 U /μl

            I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

            PDP-200

            1,250單位,2.5 U /μl

            I-5™Hi-Fi DNA聚合酶

            PDP-OEM

            任何尺寸

             

            名稱

            貨號

            描述

            I-5™Hotstart DNA聚合酶

            I5HD-100

            250單位,2.5 U /μl

            I-5™Hotstart DNA聚合酶

            I5HD-200

            1,250單位,2.5 U /μl

            I-5™Hotstart DNA聚合酶

            I5HD-OEM

            任何尺寸

            名稱

            貨號

            尺寸

            濃度

            Pfu DNA聚合酶

            AD-200

            500個單位

            2.5 U /μl

            Pfu DNA聚合酶

            AD-205

            1,000個單位

            2.5 U /μl

            Pfu DNA聚合酶

            AD-210

            2,500個單位

            2.5 U /μl

            Pfu DNA聚合酶

            AD-OEM

            任何尺寸

             

             

            名稱

            貨號

            尺寸

            濃度

            Taq DNA聚合酶(常規(guī))

            TR-100

            1,250個單位

            5 U /μl

            Taq DNA聚合酶(常規(guī))

            TR-200

            5,000單位

            5 U /μl

            Taq DNA聚合酶(常規(guī))

            TR-OEM

            任何尺寸

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

            上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購服務(wù)商

            1:強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。

            2:產(chǎn)品種類齊全,經(jīng)營超過700多個品牌,基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。

            3:提供加急服務(wù),貨品一般1-2周到貨。

            4:富有競爭力的價格優(yōu)勢,絕大部分價格有優(yōu)勢。

            5:多年積累良好的信譽(yù),大部分客戶提供貨到付款服務(wù)??蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國藥、fisher等藥企。

            6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。

            7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā),歡迎合作。

             

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