swant CR 7697說(shuō)明書(shū)

Swant是瑞士一家生物科技公司，產(chǎn)品包括用于鈣結(jié)合蛋白（D-28k），鈣調(diào)蛋白，離子通道蛋白，神經(jīng)遞質(zhì)的抗體和抗原，用于神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及癌細(xì)胞的染色產(chǎn)品和用于免疫組合的單抗和多抗。

針對(duì)Ca ²⁺結(jié)合蛋白的抗體

鈣結(jié)合蛋白

swant CR 7697說(shuō)明書(shū)

Rabbit anti-calretinin

產(chǎn)品：兔抗鈣素
代碼編號(hào)：7697
批號(hào)：1893-0114
凍干全血（不含防腐劑）。
數(shù)量：200微升。
重組：用200微升蒸餾水。
描述
用重組免疫法在家兔體內(nèi)制備抗鈣素抗血清。
在N末端含有6-his標(biāo)記的人鈣素?？贵w的評(píng)估特異性和效力：a）通過(guò)生物素-親和素標(biāo)記冷凍切片、振動(dòng)切片和石蠟切片4%多聚甲醛固定腦和b）免疫酶標(biāo)記
免疫印跡。
該產(chǎn)品是一種抗鈣素（1）的多克隆抗血清，鈣結(jié)合蛋白為EF家族與鈣結(jié)合蛋白D-28K和鈣調(diào)素有關(guān)。抗體反應(yīng)特別是來(lái)源于人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠的組織中的鈣蛋白。豬、雞和魚(yú)（圖1）。這種抗血清不會(huì)與鈣結(jié)合蛋白D-28K發(fā)生交叉反應(yīng)?；蚱渌阎拟}結(jié)合蛋白，通過(guò)免疫印跡和在大腦中的分布（圖2）。
免疫印跡
在圖1中，從不同物種的整個(gè)大腦中分離出可溶性蛋白的提取物。
以SDS-PAGE分隔。在蛋白印跡法中，抗血清7697特別是
識(shí)別29-30k Da的波段。

圖1不同種抗血清7697的腦勻漿免疫印跡。1:老鼠，2:老鼠，3.幾內(nèi)亞豬，4。兔子，5。
帶筋膜的金剛鸚鵡，6。斑馬魚(yú)，7。雞肉，8。重組calretinin

鈣蛋白敲除小鼠的免疫組化研究
抗體7697以率標(biāo)記正常大腦神經(jīng)元的亞群（圖2a）。
但不會(huì)污染calretinin敲除小鼠的大腦（圖2b）。

圖2a抗血清7697免疫組化染色
在對(duì)照鼠的大腦皮層。注意到
不同層次上分散的中間神經(jīng)元染色。X100
圖2b：缺乏特異性免疫組化
用7697抗血清在A腦皮質(zhì)染色
降鈣素敲除小鼠（2）。X 100

使用
鈣黃素可能屬于“觸發(fā)”鈣結(jié)合蛋白類(lèi)。它發(fā)生了
主要存在于神經(jīng)細(xì)胞的亞群中，是間皮瘤的優(yōu)良標(biāo)志物。
（3，4）。
工作稀釋液
免疫組化：多聚甲醛（4%）或福爾馬林固定1:2000-1:5'000。
組織切片、冷凍切片或石蠟切片。
免疫印跡：1:1'000-1:2'000。
對(duì)于免疫組化和免疫印跡，通過(guò)使用
生物素親和素法。我們建議用滴定法測(cè)定適合稀釋度。
實(shí)驗(yàn)。
存儲(chǔ)：
重組后，冷凍成小份（例如1微升）并保持在-80°C（或至少-20°C）。連續(xù)使用時(shí)，保持在4°C（含0.01%疊氮鈉）。避免重復(fù)凍結(jié)解凍。