genelink凝膠純化產(chǎn)品簡介

　更新時間：2022-03-18　點擊量：1083

genelink凝膠純化產(chǎn)品簡介

如果應用是用于 PCR 或測序，所有短于 40mer 的 Gene Link 寡核苷酸通常不需要任何進一步的純化。強烈建議將凝膠純化用于涉及產(chǎn)品克隆的所有應用，例如誘變、克隆或基因構(gòu)建應用。不建議使用反相柱或 HPLC 純化。

純化	50納摩爾	200 毫摩爾	1毫米摩爾	2毫米摩爾	10米摩爾_	15米摩爾_
凝膠純化	75.00 美元	75.00 美元	$150.00	$280.00	$1500.00	$1800.00
反相墨盒 (RPC)*	$30.00	$30.00	$90.00	$170.00	$750.00	$900.00

* 不建議對超過 35mer 的寡核苷酸進行反相柱純化。

純化
產(chǎn)品	目錄號	價格 $
聚丙烯酰胺凝膠純化；50 & 200 nmol 規(guī)模	26-6400-77	75.00
聚丙烯酰胺凝膠純化；1 m摩爾刻度	26-6400-55	150.00
聚丙烯酰胺凝膠純化；2 m摩爾刻度	26-6400-88	280.00
聚丙烯酰胺凝膠純化；10 m摩爾刻度	26-6400-44	1500.00
聚丙烯酰胺凝膠純化；15 m摩爾刻度	26-6400-99	1800.00
反相筒純化；50 & 200 nmol 規(guī)模	26-6400-11	30.00
反相筒純化；1 m摩爾刻度	26-6400-22	90.00
反相筒純化；2 m摩爾刻度	26-6400-23	170.00
反相筒純化；10 m摩爾刻度	26-6400-33	750.00
反相筒純化；15 m摩爾刻度	26-6400-34	900.00

寡核苷酸純化

DNA 的自動化化學合成得到了迅速改進，化學方面取得了巨大的進步，使常規(guī)偶聯(lián)產(chǎn)率超過 99%，并且每個合成周期不到 3 分鐘的自動化非常可靠。在 20-30 聚體范圍內(nèi)獲得的最終寡核苷酸產(chǎn)物基本上是純的，具有非常低的截短序列，因此對于大多數(shù)涉及聚合酶鏈式反應 (PCR*) 和 DNA 測序的常規(guī)應用不需要進一步純化。其他應用可能需要純化，建議用于克隆、定點誘變、連接等。

寡核苷酸的純化可以通過多種方法完成，根據(jù)具體要求進行選擇?？捎煤徒?jīng)常使用的常用技術是聚丙烯酰胺凝膠純化 (PAGE)、HPLC 和反相柱 (RPC)。下表總結(jié)了上述每種技術的純化范圍。

	頁	高效液相色譜	RPC
8-40mer	是的	是的	是的
41-200mer	是的	不	不

聚丙烯酰胺凝膠純化

這種方法的純化被認為是寡核苷酸純化的黃金標準。PAGE 純化可用于任何長度的寡核苷酸（與僅限于寡核苷酸的 HPLC 和 RPC 柱相比，優(yōu)選低于 35 聚體）。這種技術也是勞動強度高的方法。制備適當百分比的聚丙烯酰胺凝膠 (10-20%) 并對寡核苷酸進行電泳。主要產(chǎn)物是最慢的遷移帶，通過紫外線陰影識別并切除。然后凝膠切片通常通過壓碎和浸泡法進行寡核苷酸洗脫處理。

高效液相色譜

HPLC 純化通?；诶檬杷|(zhì)的反相。寡核苷酸是用三苯甲基 ON（合成寡核苷酸最后一個堿基的 5' OH 處的三苯甲基）合成的，洗脫圖譜首先洗脫所有非三苯甲基化截短序列，然后洗脫疏水結(jié)合的全長寡核苷酸。該方法產(chǎn)生大于 95% 的純度，具體取決于寡核苷酸的序列和長度?；诜聪嗟?HPLC 在 35-40mer 寡核苷酸以上失敗，因為較長的寡核苷酸本質(zhì)上是疏水的并且非特異性結(jié)合。

反相墨盒

這是 HPLC 反相純化的廉價替代品。用于反相純化的小柱通常包含疏水性基質(zhì)，例如 C18 二氧化硅，純化原理與 HPLC 相同，根據(jù)寡核苷酸的序列和長度，純化可達到約 95% 的純度?；诜聪嘀募兓?35-40mer 寡核苷酸以上也失敗，因為較長的寡核苷酸本質(zhì)上是疏水的并且非特異性結(jié)合。