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            當(dāng)前位置:首頁(yè)資料下載CompTech MCAR 說(shuō)明書

            CompTech MCAR 說(shuō)明書

            發(fā)布時(shí)間:2018/7/4點(diǎn)擊次數(shù):570

             

            上海起發(fā)為complementtech一級(jí)經(jīng)銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購(gòu)Advanced Research Technologies。Complement Technology繼續(xù)為世界各地的科學(xué)家提供高質(zhì)量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應(yīng)用提供試劑和使用我們補(bǔ)充試劑的建議。 

            CompTech MCAR 說(shuō)明書

            名稱:       MCAR(Mouse Complement Assay Reagent)

            目錄編號(hào):     B250

            可用尺寸:        1.0 mL

            濃度:          > 0.4 mg / mL  

            形式:                         冷凍溶液

            緩沖區(qū):                       VBS

            防腐劑:             0.025%sodium azide

            存儲(chǔ):                     -70 Ò C或以下。

            來(lái)源:                       兔子

            產(chǎn)地:                       在美國(guó)制造。

             

             

            一般描述

            小鼠補(bǔ)體很難分析。  小鼠血清迅速喪失其活性,小鼠血清的典型滴度遠(yuǎn)低于人血清中發(fā)現(xiàn)的150-200 CH50單位/ mL。  小鼠品系的補(bǔ)體CH50滴度差異很大(參考文獻(xiàn)1,2和3),許多常見(jiàn)的小鼠品系在遺傳上缺乏C5(參考文獻(xiàn)4和5),這意味著它們即使具有*功能性的補(bǔ)體也不能溶解細(xì)胞。系統(tǒng)。  C5足夠菌株中低滴度的確切原因尚不*清楚,并且它們對(duì)于不同的小鼠品系可能是不同的。  然而,常見(jiàn)的原因是小鼠經(jīng)典途徑組分未被與EA結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)抗體有效激活。  在Complement Technology,Inc。,我們開發(fā)了一種*的溶血試劑(MCAR =小鼠補(bǔ)體分析試劑),可以使綿羊紅細(xì)胞敏感,從而提供改善的小鼠CH50滴度。  例如,市售的小鼠補(bǔ)體在下述測(cè)定系統(tǒng)中表現(xiàn)出僅約12單位/ mL的CH50,然而,在MCAR存在的情況下,CH50是217.這是MCAR補(bǔ)體效價(jià)的18倍。  這在數(shù)值上與正常人血清CH50相當(dāng),但是測(cè)定是不同的。  目前我們不能說(shuō)這種試劑可以使用多少小鼠品系,但是我們已經(jīng)使用了3個(gè)MCAR,并且它對(duì)所有人都起到了同樣的作用。  

            小鼠血清在小鼠體外也極不穩(wěn)定。  我們已經(jīng)(如果在4左100%的損失解凍后觀察到活性的快速損失ö ℃過(guò)夜)。  因此,我們建議快速解凍NMS并立即在分析中使用它,或者是否需要等分和冷凍NMS。 應(yīng)在水浴中快速解凍,解凍后立即移至濕冰中,等分并盡快重新冷凍。  使用時(shí),僅在實(shí)驗(yàn)裝置準(zhǔn)備好NMS樣品時(shí)解凍,并在解凍后將其保持在濕冰上。

             

            測(cè)定

            在補(bǔ)體測(cè)定中,即使來(lái)自相同的小鼠品系,每批小鼠補(bǔ)體也將具有不同的滴度。  需要進(jìn)行初步測(cè)定以確定要使用的正確NMS量。  如果MCAR增強(qiáng)裂解,正常致敏綿羊細(xì)胞(EA)效果很好。  大多數(shù)NMS樣品通常含有大量血紅蛋白,因此使用的血清越多,背景越高。  樣品測(cè)定方案顯示在下表中,其中總測(cè)定體積在100uL /測(cè)定下保持小。  通常,管應(yīng)在室溫下設(shè)置緩沖液和MCAR。  然后加入EA,混合并在室溫下溫育5分鐘。    在室溫下將MCAR與EA細(xì)胞孵育5分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間后,加入NMS以開始測(cè)定。  管應(yīng)該被混合,并轉(zhuǎn)移到一個(gè)37 ö ℃水浴用于與通過(guò)偶爾(每5-10分鐘)再懸浮30分鐘渦旋。 

             

            需要注意的一點(diǎn)是,在將EA與MCAR混合后不要將EA離心,并且不要制備EA和MCAR的主混合物,然后移液到管中。  這些程序?qū)?dǎo)致不一致的結(jié)果。

             

            在37 30分鐘后Ó C中,測(cè)定法是用200稀釋微升冷GVBE,通過(guò)混合,渦旋,離心以沉淀未裂解的細(xì)胞和200 微升的上清液應(yīng)轉(zhuǎn)移到一個(gè)平底微量和吸光度在415nm讀。  或者,可以使用微量比色皿和分光光度計(jì)。 

             

            EA 在GVB ++中以5×10 8 / ml使用,所有稀釋在GVB ++緩沖液中進(jìn)行。

                         

            Protocol for Titering Normal Mouser Serum and MCAR

            Mix &

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

             

            Spin

            %

             

             

             

             

             

             

            5 min

            Mouse

             

            30 min

            Cold

            A415

            Lysis

            #

            GVB++

            H2O

            GVBE

            MCAR

            EA

            21oC

            Serum

            Mix

            @ 37

            GVBE

             

             

            1

             

             

            70 uL

            10 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            2

             

             

            70 uL

            10 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            3

            90 uL

             

             

             

            10uL

             

             

             

             

            200 uL

             

             

            4

            90 uL

             

             

             

            10uL

             

             

             

             

            200 uL

             

             

            5

             

            80 uL

             

             

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            6

             

            80 uL

             

             

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            7

            85 uL

             

             

            0 uL

            10uL

             

            5 uL

             

             

            200 uL

             

             

            8

            80 uL

             

             

            0 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            9

            70 uL

             

             

            0 uL

            10uL

             

            20 uL

             

             

            200 uL

             

             

            10

            60 uL

             

             

            0 uL

            10uL

             

            30 uL

             

             

            200 uL

             

             

            11

            80 uL

             

             

            5 uL

            10uL

             

            5 uL

             

             

            200 uL

             

             

            12

            75 uL

             

             

            5 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            13

            65 uL

             

             

            5 uL

            10uL

             

            20 uL

             

             

            200 uL

             

             

            14

            55 uL

             

             

            5 uL

            10uL

             

            30 uL

             

             

            200 uL

             

             

            15

            75 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

            5 uL

             

             

            200 uL

             

             

            16

            70 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            17

            60 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

            20 uL

             

             

            200 uL

             

             

            18

            50 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

            30 uL

             

             

            200 uL

             

             

            19

            70 uL

             

             

            15 uL

            10uL

             

            5 uL

             

             

            200 uL

             

             

            20

            65 uL

             

             

            15 uL

            10uL

             

            10 uL

             

             

            200 uL

             

             

            21

            55 uL

             

             

            15 uL

            10uL

             

            20 uL

             

             

            200 uL

             

             

            22

            45 uL

             

             

            15 uL

            10uL

             

            30 uL

             

             

            200 uL

             

             

            23

            80 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

             

             

             

            200 uL

             

             

            24

            80 uL

             

             

            10 uL

            10uL

             

             

             

             

            200 uL

             

             

                         

            通過(guò)從每個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的A415值(例如#7-22)中減去背景A415值(#1和2的平均值)并除以大裂解(#5和6的平均值)減去%Lysis。背景,然后乘以100。

             

            參考

            1.   具有典型哺乳動(dòng)物補(bǔ)體活性水平的Ong GL和Mattes MJ小鼠品系。J Immunol Methods 125:147-158,1989。

             

            2.   van Dijk,H。等人。  利用致敏兔紅細(xì)胞估計(jì)小鼠補(bǔ)體活性的經(jīng)典途徑。J Immunol Methods 39:257-268,1980。

             

            3.   特里WD等人。  近交系小鼠血清補(bǔ)體活性的差異。  J Immunol。92:576-578,1964。

             

            4.   Nilsson UR和Muller-Eberhard,HJ缺乏繼承補(bǔ)體缺陷的小鼠的第五組分。J Exp。醫(yī)學(xué)。124:1-16,1967。

             

            5. Wetsel,RA等人。小鼠第五補(bǔ)體成分(C5)的缺乏。5'-外顯子中的2堿基對(duì)基因缺失。J. Biol。化學(xué)。265:2435-2440,1990。 

             

             

            僅供研究使用。

            不適合人類或藥物使用。

             

             

             

            complementtech產(chǎn)品目錄:

             

            貨號(hào)

            品名

            規(guī)格 

            目錄價(jià)

            品牌

            A098

            C1

            200µg

            3400

            complementtech

            A099

            C1q

            1000µg

            3162

            complementtech

            A100

            C1q (40% Glycerol)

            1000µg

            3162

            complementtech

            A102

            C1r Enzyme

            250µg

            3417

            complementtech

            A103

            C1s Proenzyme

            250µg

            3366

            complementtech

            A104

            C1s Enzyme

            250µg

            3281

            complementtech

            A140

            C1 Esterase Inhibitor

            1000µg

            3468

            complementtech

            A112

            C2

            50µg

            3298

            complementtech

            A113

            C3

            250µg

            2482

            complementtech

            A113c

            C3 (concentrated)

            1000µg

            7327

            complementtech

            A118

            C3a

            50µg

            3162

            complementtech

            A119

            C3a desArg

            50µg

            3043

            complementtech

            A114

            C3b

            250µg

            3094

            complementtech

            A115

            iC3b

            250µg

            3417

            complementtech

            A116

            C3c

            250µg

            3706

            complementtech

            A117

            C3d

            100µg

            3825

            complementtech

            A105

            C4

            250µg

            3468

            complementtech

            A105c

            C4 (concentrated)

            1000µg

            8245

            complementtech

            A106

            C4a

            50µg

            4114

            complementtech

            A107

            C4a desArg

            50µg

            4114

            complementtech

            A108

            C4b

            250µg

            2992

            complementtech

            A109

            C4b Binding Protein

            250µg

            4131

            complementtech

            A120

            C5

            250µg

            3570

            complementtech

            A144

            C

            30µg

            6188

            complementtech

            A144(300)

            C

            300µg

            詢價(jià)

            complementtech

            A145

            C desArg

            50µg

            4301

            complementtech

            A122

            C5b,6

            50µg

            3468

            complementtech

            A123

            C6

            250µg

            3366

            complementtech

            A124

            C7

            250µg

            3366

            complementtech

            A125

            C8

            250µg

            3536

            complementtech

            A126

            C9

            250µg

            3366

            complementtech

            A127

            SC5b-9 Complex

            100µg

            2992

            complementtech

            A135

            Factor B

            250µg

            3213

            complementtech

            A136

            Factor D

            25µg

            3417

            complementtech

            A137

            Factor H

            250µg

            2958

            complementtech

            A137c

            Factor H (conc.)

            10000µg

            詢價(jià)

            complementtech

            A138

            Factor I

            100µg

            3366

            complementtech

            A139

            Factor P

            100µg

            3468

            complementtech

            A150

            Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

            1000µg

            3298

            complementtech

            A154

            Factor Ba

            100µg

            3298

            complementtech

            A155

            Factor Bb

            250µg

            6188

            complementtech

            A118

            C3a

            50µg

            3162

            complementtech

            A119

            C3a desArg

            50µg

            3043

            complementtech

            A106

            C4a

            50µg

            4114

            complementtech

            A107

            C4a desArg

            50µg

            4114

            complementtech

            A144

            C

            30µg

            6188

            complementtech

            A144(300)

            C

            300µg

            詢價(jià)

            complementtech

            A145

            C desArg

            50µg

            4301

            complementtech

            A300

            C1q-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A312

            C2-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A314

            C3-Dpl

            1ml

            2482

            complementtech

            A305

            C4-Deficient Guinea Pig

            1ml

            2448

            complementtech

            A308

            C4-Dpl           

            1ml

            2482

            complementtech

            A320

            C5-Dpl

            1ml

            2125

            complementtech

            A323

            C6-Dpl

            1ml

            2040

            complementtech

            A324

            C7-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A325

            C8-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A326

            C9-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A335

            Factor B-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A336

            Factor D-Dpl   

            1ml

            2074

            complementtech

            A337

            Factor H-Dpl

            1ml

            2686

            complementtech

            A338

            Factor I-Dpl    

            1ml

            2482

            complementtech

            A339

            Factor P-Dpl

            1ml

            2482

            complementtech

            A340

            C3/C4 Inactivated Serum

            1ml

            2074

            complementtech

            A399

            C1q/Factor D-Dpl  

            1ml

            2856

            complementtech

            A200

            Goat Anti-Human C1q     

            1ml

            1054

            complementtech

            A212

            Goat Anti-Human C2

            1ml

            2329

            complementtech

            A213

            Goat Anti-Human C3

            1ml

            1054

            complementtech

            A218

            Rabbit Anti-Human C3a

            1ml

            2550

            complementtech

            A205

            Goat Anti-Human C4

            1ml

            1054

            complementtech

            A206

            Rabbit Anti-Human C4a

            1ml

            2550

            complementtech

            A220

            Goat Anti-Human C5

            1ml

            1275

            complementtech

            A221

            Rabbit Anti-Human rC

            1ml

            2550

            complementtech

            A223

            Goat Anti-Human C6

            1ml

            1275

            complementtech

            A224

            Goat Anti-Human C7

            1ml

            1275

            complementtech

            A225

            Goat Anti-Human C8

            1ml

            1275

            complementtech

            A226

            Goat Anti-Human C9

            1ml

            1275

            complementtech

            A227

            Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

            0.2ml

            2584

            complementtech

            A235

            Goat Anti-Human Factor B

            1ml

            1275

            complementtech

            A236

            Goat Anti-Human Factor D

            1ml

            2499

            complementtech

            A237

            Goat Anti-Human Factor H

            1ml

            1275

            complementtech

            A238

            Goat Anti-Human Factor I

            1ml

            1309

            complementtech

            A239

            Goat Anti-Human Factor P

            1ml

            1462

            complementtech

            A240

            Goat Anti-Human C1-INH        

            1ml

            1173

            complementtech

            A260

            Rabbit Anti-Human Vitronectin

            1ml

            1445

            complementtech

            NHS

            Human Serum

            1ml

            578

            complementtech

            GPS

            Guinea Pig Serum

            1ml

            714

            complementtech

            NRS

            Rat Serum

            1ml

            901

            complementtech

            NMS

            Mouse Serum   

            1ml

            1309

            complementtech

            B102

            GVB++ (with Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B100

            GVB++ (with Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B103

            GVB° (without Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B101

            GVB° (without Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B104

            GVBE (with EDTA)

            250ml

            1224

            complementtech

            B105

            GVBE (with EDTA)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B110

            SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

            250ml

            1870

            complementtech

            B111

            SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

            1 Liter

            5066

            complementtech

            B112

            VBS++ (with Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B113

            VBS++ (with Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B200

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            5ml @ 5x108/ml

            3043

            complementtech

            B201

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            10ml @ 5x108/ml

            4556

            complementtech

            B202

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            20ml @ 5x108/ml

            6324

            complementtech

            B210

            Es (sheep E)

            20ml @ 5x108/ml

            2652

            complementtech

            B300

            Er (rabbit E)

            5ml @ 5x108/ml

            1649

            complementtech

            B301

            Er (rabbit E)

            10ml @ 5x108/ml

            2652

            complementtech

            B302

            Er (rabbit E)

            20ml @ 5x108/ml

            3893

            complementtech

            B400

            Zymosan (preactivated)

            10ml @ 1x109/ml

            2261

            complementtech

            B106

            MgEGTA

            10ml @ 0.1M

            1139

            complementtech

            B250

            MCAR

            1.0 ml

            2482

            complementtech

            Hemolysin

            Hemolysin  NEW

            2.0 ml

            2040

            complementtech

             

             

            上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

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