ALSTEM VP100說明書

ALSTEM VP100說明書

ALSTEM是一家位于灣區(qū)的早期生物技術(shù)公司，擁有快速擴展的產(chǎn)品和服務(wù)組合，為生物制藥和學術(shù)機構(gòu)提供服務(wù)。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發(fā)，ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術(shù)專業(yè)知識的科學家創(chuàng)立。

Lentiviral Packaging Mix: #VP100

慢病毒包裝混合物：＃VP100

描述

慢病毒包裝混合物是一種即用型第三代基于HIV的慢病毒包裝系統(tǒng)，其中質(zhì)粒表達慢病毒生產(chǎn)所需的元件。為了生產(chǎn)高質(zhì)量的慢病毒顆粒，所需要的只是含有您感興趣基因的慢病毒表達載體。慢病毒包裝混合物含有必需的包裝載體，其含有病毒結(jié)構(gòu)蛋白和包膜載體以表達水泡性口炎病毒糖蛋白（VSVG）。慢病毒包裝混合物是TAT獨立的，因為它僅支持具有嵌合5'LTR的慢病毒表達載體，其中HIV啟動子被CMV或RSV替代。

• 概觀

慢病毒包裝混合物是第三代包裝質(zhì)粒的優(yōu)化配方，提供輔助功能以及產(chǎn)生高滴度慢病毒所需的反式結(jié)構(gòu)和復制蛋白。

1.將含有慢病毒顆粒的培養(yǎng)基從平板轉(zhuǎn)移到無菌容器中，并以300×g離心培養(yǎng)基10分鐘以除去細胞碎片。

2.通過0.45μm過濾器過濾上清液。

3.將過濾的上清液轉(zhuǎn)移到無菌容器中，并向每4體積的含有慢病毒的上清液中加入1體積的冷的慢病毒沉淀溶液（4℃）。（實施例：5ml慢病毒沉淀溶液，含20ml病毒上清液）。

4.充分混合并冷藏3小時至過夜。與Lentivirus沉淀溶液混合的含有慢病毒的上清液在4°C下可穩(wěn)定長達4天。

5.在4℃下以1500×g離心混合物30分鐘。離心后，慢病毒顆?？稍谌萜鞯撞匡@示為米色或白色顆粒。

6.丟棄上清液。通過以1500×g離心5分鐘來旋轉(zhuǎn)殘留溶液。通過抽吸去除所有的液體痕跡，小心不要打擾顆粒中沉淀的慢病毒顆粒。

7.使用冷的無菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始體積重懸慢病毒顆粒。

8.在低溫小瓶中分裝并儲存在-80°C直至準備使用。

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務(wù)商

1：強大的進口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營超過700多品牌，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。

4：富有競爭良好的信譽，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等知藥企。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發(fā)，歡迎合作。